
2024年9月由常州占农业的大部分院校张万刚硕士生导师管理团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章,研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低(P < 0.05),并表现出剂量依赖性的抑制作用,其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化,进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物技术为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物,助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。
中文名字文章标题:体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响
中文核心期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry
2026年反应系数:5.7
公布时:2024年9月
的客户行业:南京农业大学
实验涂料:蛋白
拜谱提供数据的技术:亚硝基化修饰组学
科技路线规划:
一、探索然而
01.Caspase-3渗透性
现阶段尚不知道NO对caspase-3的促使的作用是否需要归因于NO介导的S-亚硝基化,不一密度均值的GSNO用作外源性NO产生,以诱发caspase-3的离体S-亚硝基化。可是表面,与沒有GSNO的组想必,100、200和400μM GSNO组的caspase-3几丁质酶酶类更为明显减小(图1),与原本报到不符。GSNO处里减小caspase-3几丁质酶酶类的因素根本原因仍急待揭示。
图1 其他氧浓度的GSNO清理对caspase-3活力的反应
02.Caspase-3的S-亚硝基化限度
分析Caspase-3的亚硝基化的情况,以阐释GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO除理后,在线判断到caspase-3淀粉酶S-亚硝基化的强度提高(图2)。以上然后表示,外源性GSNO锻炼可取得成功诱骗caspase-3的体内S-亚硝基化。引人目瞪口呆的是,在就没有GSNO出现的照表组中在线判断到一名不大的S-亚硝基化带,这表示caspase-3有可能发生内源性的S-亚硝基化。再者,本分析中caspase-3的S-亚硝基化的情况较高,而caspase-3的渗透性降低,这与前的分析不符。然后,caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化修饰语位点尚不非常清楚,还必须要进这一步的研究。
图2 GSNO解决对caspase-3S-亚硝基化质量的应响
03.Caspase-3的S-亚硝基化位点
通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明,caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰(图3)。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中,分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶,其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化,说明Caspase-3易受亚硝基化修饰(图4)。此外,据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163,这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断,半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的,这可能影响蛋白降解,促进死后衰老。
图 3 caspase-3的编码回文序列。灰色标示的编码回文序列代表S-亚硝基化肽,灰色标示的C代表S-亚硝基化半胱氨酸
图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪
04.S-亚硝基化Caspase-3分解结蛋白酶
结血清作为一个某种关键性的组织骨架血清,在继续肌组织机构的机构删改性和抽缩性领域起着关键性目的,理论研究S-亚硝基化caspase-3对结血清光化学降解的的准确性认识具备着关键性重要性。与Std(未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的刚开始肌人造纤维板血清)组比起来,0 μM GSNO组(肌原人造纤维板和caspase-3的孵育,无GSNO)的删改结血清含铁的重要拉低,提示信息caspase-3对结血清具备着存在的血清油脂水解技能。在GSNO孵育后,删改结血清的含铁的比较明显增强(P < 0.05)。不仅,当GSNO浓度值上升时,删改结血清的含铁的继续调整(P < 0.05)(图5)。这一项察觉认为,SNO淡化的caspase-3以技术依赖关系的模式治理和改善结血清的光化学降解。
图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结蛋清
05.S-亚硝基化Caspase- 3降解塑料肌钙蛋白酶-T
肌钙核核核蛋白质质质质-T (TnT)是原肌球核核核蛋白质质质质改善责任人腿部肌肉紧缩的细条的也要肌原合成氯纶棉核核核蛋白质质质质。TnT的溶解特征英文是论文的检测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化条件下,caspase-3对TnT的溶解前提如图已知6表达,与Std组(不添加caspase-3和GSNO的肌原合成氯纶棉)比较,caspase-3组中30 kDa TnT片断取得性提高,显示caspase-3进行了TnT的溶解,除外,caspase-3与GSNO的孵育促使30 kDa TnT减掉。在100和200 μM GSNO组互相没了论文的检测到严重的性别差异(P > 0.05),而当GSNO的有机废气浓度完成400 μM 时,该片断取得性减掉(P < 0.05)。这部分出现 显示了SNO突显的caspase-3对TnT溶解的治理和改善的作用。结核核核蛋白质质质质和TnT是caspase-3的灵敏底物,而GSNO补救消减caspase-3的生物有机会促使肌原合成氯纶棉核核核蛋白质质质质溶解阶段消减。由此可见说明,NO诱惑的S-亚硝基化就可以借助突显半胱氨酸残基来改善caspase-3的生物,借以再次骤引响其对结核核核蛋白质质质质和TnT的核核核蛋白质质质质电离程度,而使引响牛肉片高质量。
图6. S-亚硝基化caspase- 3挥发肌钙蛋白质-T
二、个人总结
本科研广泛宣传探析S-亚硝基化对caspase-3表达的不良直接影响基本其次对牛羊肉片肌原仟维休外生物降解的不良直接影响。核蛋清S-亚硝基化可不可以表达caspase-3的半胱氨酸残基,然后诱发caspase-3活性氧变低,进这一步压制了其对牛羊肉片肌原仟维核蛋清的核蛋清油脂水解功能。三、拜谱总结ppt
科研用于了酶活核查,亚硝基化突显组学介绍,WB等在线检测途径,会发现核淀粉酶质酶S-亚硝基化还可以突显caspase-3的半胱氨酸残基,这促使了caspase-3活性酶的减低,并举十步控制了其对羊肉肌原仟维核淀粉酶质酶的核淀粉酶质酶淀粉水解的能力。本科研为讲解核淀粉酶质酶质亚硝基化对肉肥的宏观调控原则供应新一个新的视域。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,可提供完善成熟的血清质组学、绘制血清质组学、消化吸收组学、转录组学等多组学产品技术服务体系,整合多组学数据进行深入挖掘分析,全面解析机制机理等,助力高分文章发表。除此之外,拜谱生物还可提供半胱氨酸系列的企业产品,包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺硝化作用、total腐蚀呈现、徘徊巯基,欢迎大家咨询!
可以参考学术论文:
Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663